罗超¹ , 黄武略¹ , 朱佳鹏¹ , 冯志熙¹ , 刘应丽¹ , 黄海泉^1,2* , 黄美娟^1,2*

1 西南林业大学园林园艺学院, 昆明, 650224; 2 西南林业大学, 园林园艺花卉研发中心, 昆明, 650224
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2020 年, 第 18 卷, 第 31 篇   
收稿日期: 2019年08月09日    接受日期: 2019年08月19日    发表日期: 2020年09月23日

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SSR-PCR 反应体系的建立与优化是凤仙花属植物(Impatiens L.) SSR 标记研究的基础，本研究以 8种凤仙花属植物为试材，对 Mg²⁺、Taq 酶、dNTPs 浓度、DNA 模板、引物浓度等 5 因素进行 L₁₆(4⁵)正交试验，探讨适合凤仙花属植物的 SSR-PCR 反应体系，并对主要因素进行优化。结果表明：Mg²⁺、Taq 酶和 dNTPs 浓度 3 个因素对凤仙花属 SSR-PCR 扩增结果有显著影响，影响程度为 Mg²⁺＞Taq 酶＞dNTPs 浓度＞DNA 模板＞引物浓度；20 μL 为最佳反应体系，其中，2.6 mmol/L (含 10×PCR Buffer)的 Mg²⁺，1.6 mmol/L 的 dNTPs，2 μmol/L的引物，60 ng 的 DNA，0.1 U 的 Taq 酶，ddH2O 补齐剩余部分。利用优化后的反应体系对同属 54 种材料进行PCR 扩增，扩增产物在 130~200 bp，具 4 个等位基因，目标条带清晰，多态性良好。该体系的建立可为今后利用 SSR 标记对凤仙花种质鉴定、遗传多样性分析、系统发育研究、遗传图谱构建、基因定位和分子标记辅助育种等研究提供了依据。
 

凤仙花；SSR-PCR；体系建立；正交试验